CRISPR Cas9 시스템의 비표적 편집(Off-target Editing) 최소화를 위한 가이드 RNA(gRNA) 디자인 전략 비교 분석

CRISPR-Cas9 시스템은 높은 유전체 교정 능력을 가지지만, 의도하지 않은 위치를 절단하는 비표적 편집(Off-target Editing)이 주요 안전성 문제로 남아있습니다.

gRNA 설계의 도전과 해결책

• 초기에는 단순히 서열 유사성을 기준으로 gRNA를 선택했으나, 이는 유사도가 낮은 곳에서도 절단 위험을 내포했습니다.
• 최근 연구들은 PAM 서열 근접성, gRNA의 길이에 따른 구조적 안정성, 그리고 원하는 타겟과의 불완전한 상보성 정도를 종합적으로 고려하여 최적의 gRNA를 설계하는 방향으로 발전하고 있습니다.

또한, Cas9 변이체 사용이나 Base Editor, Prime Editor와 같은 대안 기술들이 Off-target 문제를 우회하거나 감소시키는 방식으로 활발히 연구되고 있으며, 이는 전통적인 Cas9 시스템 대비 정확성 측면에서 명확한 개선을 보여주고 있습니다. 유전자 가위, CRISPR 유전자 편집